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    ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)之試劑配置

    發(fā)布時(shí)間: 2014-12-29  點(diǎn)擊次數(shù): 936次

    ELISA試劑盒被廣泛運(yùn)用與各大實(shí)驗(yàn)中,其中關(guān)于實(shí)驗(yàn)中緩沖溶液等試劑的配制可能對(duì)實(shí)驗(yàn)新手來(lái)說(shuō)還是個(gè)很大的困擾。
    試劑
    (1) ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
    NaHCO3    1.59克
    NaHCO3 2.93克
    加蒸餾水至1000ml
    (2) ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
    KH2PO4   0.2克
    Na2HPO4·12H2O 2.9克
    NaCl   8.0克
    KCl 0.2克
    Tween-20 0.05%  0.5ml
    加蒸餾水至1000ml
    (3) ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液:
    牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
    加洗滌緩沖液至100ml
    或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
    (4) ELISA實(shí)驗(yàn)終止液(2M H2SO4):
    蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
    (5) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
    0.2M Na2HPO4(28.4克/L)              25.7ml
    0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
    加蒸餾水50ml。
    (6) ELISA實(shí)驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:
    TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇)   0.5ml
    底物緩沖液(PH5.5)   10ml
    0.75%H2O2                           32μl
    (7) ELISA實(shí)驗(yàn)ABTS使用液:
    ABTS 0.5mg
    底物緩沖液(PH5.5)    1ml
    3%H2O2                          2μl
    (8)ELISA實(shí)驗(yàn)封閉液:
    牛血清白蛋白(BSA) 5克
    加洗滌緩沖液至100ml。
    諾泰中國(guó)提醒:為了保證ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,實(shí)驗(yàn)操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標(biāo)板中的時(shí)候防止加入的試劑混入另外一個(gè)酶標(biāo)孔,嚴(yán)防交叉污染。

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