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    猴子β防御素(β-DF)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒

    發布時間: 2019/11/29  點擊次數: 1152次
    提 供 商: 研域(上海)化學試劑有限公司 資料大?。?/td>
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    猴子β防御素(β-DF)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒
    本試劑盒僅供研究使用。
    使用目的:本試劑盒用于測定猴子血清,血漿及相關液體樣本中β防御素(β-DF)的含量。
    實驗原理
    本試劑盒應用酶聯免疫競爭法測定標本中猴子β防御素(β-DF)水平。用純化的猴子β防御素(β-DF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入β防御素(β-DF),和HRP標記的β防御素(β-DF)抗原,使它們競爭結合,,經過*洗滌后加底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的β防御素(β-DF)的含量呈負相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中猴子β防御素(β-DF)的含量。  
    試劑盒組成 

    猴子β防御素(β-DF)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒標本要求 
    1.標本處理:(1)水樣   采集后經 -20℃反復凍融三次,再經玻璃纖維過濾后,備查
    (2)組織   樣品用丁醇:甲醇:水(5:25:70 V:V:V)抽提,或按相關文獻提取進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,備查
    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
    操作步驟
    1.加樣:分別設標準孔、空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上標準孔中加50微升,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

    2.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
    3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。   
    4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
    5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
    6.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
    7.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉)。
    8.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

    計算
      以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。 
    猴子β防御素(β-DF)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒注意事項
    1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
    2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
    3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
    4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第yi孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6.底物請避光保存。
    7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
    9.本試劑不同批號組分不得混用。
    檢測范圍:
    8.0 pg/ml -240 pg/ml
    規格:
    96人份/盒
    保存條件及有效期
    1.試劑盒保存:2-8℃。
    2.有效期:6個月

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