99国产精品免费视频观看-99国产精品热久久久久久-99国产精品人妻噜啊噜-99国产精品视频免费观看-99国产精品无码-99国产精品一区二区

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
一鍵分享網站到:
  • 資料下載DOWN

    您當前的位置:首頁 > 資料下載 > 真菌毒素檢測技術與產品服務(3)

    真菌毒素檢測技術與產品服務(3)

    發布時間: 2009/3/27  點擊次數: 2602次
    提 供 商: 研域(上海)化學試劑有限公司 資料大?。?/td>
    圖片類型: 下載次數: 0
    資料類型: 瀏覽次數: 2602
    相關產品:
    詳細介紹:

     液相色譜法測定谷物中黃曲霉毒素B1、G1、B2、G2含量

        
        
    用一種快速方便的真菌毒素多功能凈化柱處理樣品,然后用液相色譜對谷物中黃曲霉毒素B1、G1B2、G2進行測定。樣品經乙腈-體積比8416)提取,提取液通過真菌毒素多功能凈化柱凈化、濃縮,三氟乙酸(TFA)柱前衍生,C18色譜柱分離,熒光檢測器檢測,外標法定量。對添加兩個濃度黃曲霉毒素的玉米樣品進行加標回收實驗,4種毒素的回收率均在90.44%101.23%之間,B1、G1B2、G2的zui低檢測限分別為2.0、1.00.5、0.5ng/kg。實驗結果表明,此法不僅定量準確,精密度高而且操作極為方便。
         
    真菌毒素對糧食飼料的污染是一個性的問題,我國因是農業大國和人民以谷物為主食的飲食習慣,使真菌毒素的污染問題顯得更為突出。黃曲霉毒素是真菌毒素的重要代表之一,對世界上30多個國家和地區進行的調查表明,危害程度排在*位的是黃曲霉毒素。它是由黃曲霉、寄生曲霉和集峰曲霉產生的一組結構類似的化合物[1],均為二呋喃香豆素(difuranocoumarin)的衍生物。雖然黃典霉毒素(AF)的衍生物有20多種,目前已分離鑒定出的AF包括:AFB1、AFB2AFG1AFG2、AFM1、AFM2AFP1AFQ、AFH1、AFGMAFB2a和毒醇等12種,但天然污染糧油食品的AFB組和G組兩大類,即AFB1、AFB2、AFG1AFG2。黃曲霉毒素的毒性,致突變及致癌作用已得到明確證實。它由強到弱的順序依次為AFB1> AFG1>AFM1>AFB2>AFG2[2]。歐盟的黃曲霉毒素的*AFB14μg/kg。
       
    霉菌毒素的檢測定量一直是個難點,目前黃曲霉毒素檢測的國標方法有薄層色譜法、酶聯免疫法、免疫親和柱凈化液相色譜法。薄層色譜法操作繁瑣、污染大、定量差、耗時長;而酶聯免疫法雖操作簡單、靈敏度高,但特異性差;免疫親和柱液相色譜法是柱后衍生法,它對于高黃曲霉毒素含量的樣品偏差較大。且柱后衍生不普及,給使用帶來不便。本文所述方法用真菌毒素多功能凈化柱快速凈化,液相柱前衍生法簡單方便,靈敏度和特異性高,又能避免氯仿等有毒試劑的使用,是一種值得推廣的好方法。這種方法,在上不少試驗室已得到確認,還被作為AOAC的*方法。
    1
    材料與方法
    1.1
    試劑和儀器
       
    乙腈(色譜純)、甲醇(色譜純)、*(分析純)、去離子水、PuriToxSR160真菌毒素多功能凈化柱、液相色譜儀、2475熒光檢測器。
    1.2
    標準品的準備
       
    標準品包括了黃曲霉毒素B1、G1、B2、G2各單一標準液和混合標準液,溶劑為乙腈,黃曲霉素混合標準液的濃度為2μg/ml B1G1以及0.5μg/ml B2G2。單一標準液用來確定各自的保留時間,具體工作用混合標準液是將所提供標準液稀釋10倍,用微量注射器分別取5.0、10.020.025.040.050.0μl稀釋標準液具體濃度為200ng/mlB1、G1;50ng/mlB2G2),和樣品一樣蒸干,用三氟乙酸衍生,定容于0.2ml流動相,故所得進針的濃度分別是:B1G15.0、10.0、20.0、25.040.050.0ng/ml;G2、B21.252.55.0、6.25、10.0、12.5ng/ml
    1.3
    樣品
       
    實驗所用樣品包括玉米、小麥等,取代表樣品5kg,粉碎,充分混合均勻,四分法縮至500g。因霉菌毒素分布不均勻,充分混合非常重要,必要時取樣量加大(有地方建議取15kg)。
    1.4
    樣品的提取和凈化
       
    使用粉碎機將樣品研細,稱取25g研細樣品置于250ml的燒瓶或攪拌瓶中。加入100ml乙腈-水(體積比8416)溶液。在旋轉震蕩器上震蕩1h。用漏斗、定性濾紙將其過濾到樣品瓶中。轉移8ml樣品提取液通過PuriToxSR160真 菌毒素多功能凈化柱,推出大約4ml的凈化液(具體過程見圖1),轉移2ml已凈化的提取液至潔凈的棕色瓶。在水浴60條件下用氮氣吹干。
     
    1.5
    柱前衍生及液相色譜條件
       
    向剩余物中加入200μl正己烷、100μl三氟乙酸,立即旋緊蓋子。渦旋30s,在40烘箱中衍生15min,室溫下氮氣吹干混合物,用200μl-乙腈(體積比8515)溶解殘余物并渦旋30s,將其轉移到1.5ml的離心試管中以10 000r/min的速度離心5min,把已經制備凈化好的150μl樣品液轉移到HPLC樣品瓶,進樣25μl。液相色譜條件見表1。
     2
    結果與討論
    2.1 4
    種黃曲霉毒素的分離情況
       
    50μl黃曲霉毒素混標工作溶液濃度為B1、G1 200ng/ml;G2、B2 50ng/ml)于棕色瓶內,吹干,衍生,流動相定容,經液相色譜分離得出的標準色譜分離見圖2。黃曲霉毒素G1B1的濃度為50ng/mlG2、B2的濃度為12.5ng/ml。
     2.2
    標準曲線及回歸方程
       
    按實驗方法進行測定,4種黃曲霉毒素的標準曲線、回歸方程及檢出限(按3倍信噪比計算)的測定結果見圖3和表2。
     2.3
    樣品的加標回收實驗
       
    取玉米樣品一份,分別做兩個濃度的加標回收實驗。具體做法是:取8ml黃曲霉素空白樣的提取液,分別加10μl 25μl黃曲霉素混合標準液(1 000ng/ml黃曲霉素B1G1以及250ng/ml黃曲霉素B2G2)作為加標。經過和樣品一樣的處理,得出其zui后的理論濃度見下式。
       
    B1、G1濃度:(0.010ml×1 000ng/ml)/8ml×(2ml/0.2ml)=12.5ng/ml
    (0.025ml×1 000ng/ml
    /8ml×(2ml/0.2ml)=31.25ng/ml
       
    B2、G2濃渡:
    (0.010ml×250ng/ml)/8ml×(2ml/0.2ml)=3.125ng/ml

    0.025ml×250ng/ml/8ml×(2ml/0.2ml)=7.812 5ng/ml
     2.4
    精密度實驗
       
    按實驗方法進行樣品處理,對同一樣品連續測定5次。
     2.5
    樣品調查
       
    從市面上抽取10份玉米樣品,按此實驗方法進行處理,結果為未檢出黃曲霉毒素。此方法簡便易行、快速準確、靈敏度高、檢測限低,適合大批量檢測,值得推廣。
     

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

国产精品特级毛片一区二区三区 | 人人人妻人人澡人人爽欧美一区 | 久久亚洲国产精品五月天婷 | 中文字幕亚洲情99在线 | 爱情岛论坛亚洲永久入口口 | 无码少妇精品一区二区免费动态 | 情侣黄网站免费看 | 91嫩草国产在线观看免费 | 中文精品久久久久人妻不卡 | 91www在线观看| 边添小泬边狠狠躁视频 | 国产人澡人澡澡澡人碰视频 | 天天躁狠狠躁狠狠躁夜夜躁 | 亚洲精品国偷拍自产在线麻豆 | 国产精品99久久久久久宅男 | 亚洲av日韩av永久无码绿巨人 | 亚洲va久久久噜噜噜久久天堂 | 亚洲国产成人精品女人久久久 | 这里有精品可以观看 | 成人午夜福利视频 | 国产大屁股喷水视频在线观看 | ww国产ww在线观看免 | 伊人久久大香线蕉综合影院首页 | 亚洲精品一区国产精品丝瓜 | 亚洲国产av无码精品无广告 | 波多野结衣av无码久久一区 | 国产老妇伦国产熟女老妇视频 | 国产成人福利免费视频 | 久久久噜噜噜久久中文字幕色伊伊 | 精品无人码麻豆乱码1区2区 | 久久99国产综合精品 | 天天射天天日本一道 | 中文字幕被公侵犯的漂亮人妻 | 中文毛片无遮挡高潮免费 | 国产成人免费a在线视频 | 国产第一页屁屁影院 | 91蝌蚪在线视频 | 亚洲乱码无码永久不卡在线 | 国产 一二三四五六 | 伊人久久综合无码成人网 | 国产精品特级毛片一区二区三区 |