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    上海研域生物常見細胞培養(yǎng)需要哪些環(huán)境因素?

    發(fā)布時間: 2024-03-29  點擊次數(shù): 782次

    上海研域生物強大的技術研發(fā)常見細胞保證了我們售前售后的及時性,我們全程提供免費指導,如有需要,可免費上門服務。我們始終堅持初心,愿做科研行業(yè)的一股清流,讓用戶對我公司的產品品質和服務有更全面的了解。


    1.無菌環(huán)境

    無毒和無菌是體外培養(yǎng)細胞的首要條件。細胞在活體內,解毒系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)可抵抗微生物或其他有害物質的入侵,但細胞在體外培養(yǎng)的過程中,缺乏機體免疫系統(tǒng)的保護而喪失對微生物的防御能力和對有害物質的解毒能力。為保證細胞能在體外環(huán)境中生長繁殖,必須要確保無菌工作區(qū)域、良好的個人衛(wèi)生、無菌試劑和培養(yǎng)基以及無菌操作。

    常見的微生物污染有支原體、細菌、真菌。支原體無致死毒性,可與細胞長期共存,對細胞有潛在影響,但體積小,不易鑒別,可借助于地衣紅或Hoechst33342染色來進行檢測。細菌增殖快,在短時間內即可大量擴增,并產生毒素殺死細胞。真菌的種類繁多,肉眼可見,漂浮于培養(yǎng)液面上,可呈絲狀、管狀或樹枝狀等。


    2.合適的溫度

    一般哺乳類與禽類細胞在體外培養(yǎng)的適宜溫度是37~38℃,不適宜的環(huán)境溫度會影響細胞的生長。細胞對低溫的耐受能力要強于對高溫的耐受能力,在低溫下,細胞的代謝活力及核分裂能力降低。若溫度不低于0℃,雖然細胞代謝受到影響,但無損傷作用;25~35℃時,細胞以緩慢的速度生長;但若被置于40℃數(shù)小時,則不僅不利于細胞生存、生長,甚至可導致其死亡。


    3.氣體環(huán)境與pH

    細胞的體外培養(yǎng)需要理想的氣體環(huán)境,氧氣、二氧化碳是細胞生存的必要條件。氧氣參與細胞的三羧酸循環(huán),為細胞生存、代謝與合成提供能量;二氧化碳既是細胞的代謝產物,是細胞生長的必需成分,又與維持培養(yǎng)液的pH有關。大多數(shù)細胞適宜的pH范圍往往是7.2~7.4。在開放式培養(yǎng)中,以5%的二氧化碳氣體比例為宜。


    4.適宜的滲透壓

    高滲溶液或低滲溶液會引起細胞發(fā)生褶皺、腫脹、破裂。因此,滲透壓是體外培養(yǎng)細胞的重要條件之一。多數(shù)體外培養(yǎng)的細胞對滲透壓都有一定的耐受能力,實際應用中,260~320mmol/L的滲透壓可適用于大多數(shù)細胞。


    每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍,常見細胞樣品結果若超過此范圍,分析儀將顯示結果超過范圍的提示,表示試劑已經(jīng)變質,應更換合格的試劑,若使用連續(xù)監(jiān)測法,兩點法測定酶活性時,若酶活性非常高,底物接近被耗盡,吸光度上升或下降會超過某一吸光度,變化范圍,監(jiān)測期的吸光度將偏離線性,使測定結果不可靠。

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