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    2016年ELISA試劑盒的原理與組成

    發布時間: 2016-10-12  點擊次數: 1063次

    ELISA試劑盒的基本原理有:
    (1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性;
    (2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性;
    (3)酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。
    ELISA試劑盒由哪些部分組成:
    (1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

    (2)酶標記的抗原或抗體(結合物);
    (3)酶的底物;
    (4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);
    (5)結合物及標本的稀釋液;
    (6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
    (7)酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式
    ELISA試劑盒中一般采用2mol/L。

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